きんこちゃんセンセイ、柿酢を自分で作っていたんですがとんでもないものが現れました〜
キノピー先生えっ、なになにとんでもないものって？
きんこちゃんこれです！やばいでしょう？
キノピー先生うわぁ〜〜、これは鳥肌が立つね・・・
きんこちゃん見慣れたら可愛くなってきたんですが、これなんですか？
キノピー先生きんこちゃんは、もう立派な菌活ウーマンだね。顕微鏡で覗いてみようか？
きんこちゃんぜひぜひ見たいです！
キノピー先生覚悟して御覧ください
ペディオちゃん（ぼくの数百倍気持ちが悪い・・・）
事の経緯
無料のオープンチャットである日、ご相談を受けました。自作の柿酢を放置してたら凄いことになっていたと。
これなんですか？と尋ねられ、「産膜酵母か酢酸菌かなぁ」とお答えしたんですが、思いの外オープンチャットで盛り上がり、どんな菌か知りたいということになりました。
その情熱に負け、サンプルを大学に送ってもらい顕微鏡観察することになったのでした。
オープンチャットについては下の記事参照。
閲覧注意：送られてきた写真
生物顕微鏡で覗いてみよう！
ということで、生物顕微鏡で覗いてみました。
倍率は１,０００倍です（接眼レンズ１０☓対物レンズ１００）。
１,０００倍は油浸レンズという特殊なレンズを使うので一般ではなかなか見ることができない倍率だと思います。
使った顕微鏡
こんなやつです。
届いたサンプルを開けてニオイを嗅いでみた
思いっきってニオイを嗅いでみた。
意外と臭くない！
どこかで嗅いだことあるような・・・イカの塩辛？？？
ちょっとわからないですがそれほど臭くはなかったです（職業柄、臭いニオイの菌を色々嗅いできたから感覚がおかしくなっているのかもしれませんが）。
グラム染色してみた
グラム染色をしてみました。
グラム染色については下の記事を御覧ください。
固定化は本来ガスバーナーでやるんですが、今回はコンロでやりました。
これ何のためにやるかというと、菌をスライドグラスに固定化するためです。
車の窓に付いた雨水の痕を思い出してください。あれって上から水をかけたぐらいでは落ちませんよね。菌を染色するときは、液体を添加したり、水道水で洗浄したりするので固定化していないと菌が流されていなくなってしまします。そのための火炎固定です。やり方は色々ありますが割愛します。
写真のような青い液体です。グラム染色にはクリスタルバイオレットがよく使われますが、当研究室ではビクトリアブルーを使っています。染まったときの色が少し違うだけで特に違いはありません（好みです）。
それをピペッターを使って菌を塗り拡げたところに添加してきます。
次に水道水を少量だしながらスライドグラスの裏側からビクトリアブルーを洗い流します。
次にピクリン酸アルコールを使って余分な染色液を落としていきます。
グラム陽性菌はペプチドグリカン層が厚く、ペプチドグリカン層に染み込んだ染色液は脱色されませんが、グラム陰性菌は外膜が厚くペプチドグリカン層が薄いので外膜部分にある染色液はこの作業で洗い流されます。
次に余分な水気を優しく取り除いた後、染色液B（フクシン）を添加して一分待ちます。フクシンよりもサフラニンを使う人の方が多いかもしれません。ちょっと色が違います。これも好みです。
グラム陽性菌はすでに染色液Aで既に染色されているため、それ以上染まりませんが、グラム陰性菌はこれで赤色に染まります。染色してないと見づらいのでこのような作業をします。これを対比染色と呼びます。
一分待ったら、水洗して水気を優しくとったら染色完了です。
ということで、顕微鏡で観察してみました。
今回は上のカメラではなくて、接眼レンズからスマホで撮るという学生がよくやっている技を使って撮りました。
色々撮ってみた。ギャラリーをお楽しみください（クリックすると拡大されます）。
結論
まず、大きさから言ってこれは細菌ではありません。酵母の仲間と思われます。細菌はこんなに大きくないからです。
参考までに乳酸菌の写真を載せます。基準となるものがないので分かりづらいかと思いますが。。。
今までグラム染色について解説してきましたが、グラム染色は細菌用の染色法です。酵母には使いません。なのでグラム陽性・陰性は今回関係なく、形と大きさだけでの判断となります。
前述の通り大きさは酵母です。細菌ではありません。ですので柿酢に生育した菌は、酢酸菌ではないことが分かります（酢酸菌はグラム陰性桿菌です）。膜を張っているので産膜酵母だと思います。
ということで、今回の「ブツ」の正体は産膜酵母だと思われますが、産膜酵母って色々いるんですよね。形態的にPichia（ピキア）、もしくは、Candida（カンジダ）でしょうか？酵母も色々いるので分かりませんが。
小さな丸は胞子でしょうか？（赤く染まったものがあるのはそのため？）、長いのは偽菌糸（仮性菌糸）でしょうか？
私は酵母は専門外なので専門家のコメントお待ちしております。
今回は柿酢に生育した謎のブツの正体を追うというミッションでしたが、いかがだったでしょうか？形態だけではこれ以上の判断は難しいかなと思います（その他の性質を調べたり、DNA配列を読む必要あり）。でも結構時間かけて頑張りましたので許してくださいm(_ _)m。
少しでもワクワク感を味わっていただけたなら幸いです。感想等、コメント欄にお待ちしております。
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